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華洋科儀 | 圓二色光譜儀
  • 發(fā)布時(shí)間 : 2023-06-30 13:19:14
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圓二色光譜儀的工作原理是:利用蛋白質(zhì)的圓二色性及不對(duì)稱分子對(duì)左右圓偏振光吸收的不同來(lái)進(jìn)行結(jié)構(gòu)分析。蛋白質(zhì)或多肽中主要的光活性基團(tuán)是肽鍵、芳香氨基酸殘基及二硫鍵等,當(dāng)平面圓偏振光的吸收不相同時(shí),會(huì)產(chǎn)生吸收差值。由于這種吸收差的存在,造成了偏振光矢量的振幅差,圓偏振光變成了橢圓偏振光,即蛋白質(zhì)的圓二色性。通過(guò)圓二色譜掃描儀,可以在一定程度上分析蛋白質(zhì)、多肽樣品的二級(jí)結(jié)構(gòu)和高級(jí)結(jié)構(gòu)。

要測(cè)到準(zhǔn)確的蛋白質(zhì)CD譜,要同時(shí)看一看吸收譜,吸收值最好在0.5-2.0之間,這是最主要的參照標(biāo)準(zhǔn),對(duì)濃度沒有必然的規(guī)定,常見的經(jīng)驗(yàn)值為濃度在0.1-1.0 mg/ml 之間, 也可以更低或更高。

技術(shù)指標(biāo)


圓二色光譜儀


圓二色譜分析的供試品,大多數(shù)情況下的蛋白質(zhì)和多肽。蛋白質(zhì)的精確濃度是計(jì)算樣品二級(jí)結(jié)構(gòu)的關(guān)鍵,一般要求樣品濃度為0.2μg/μl,濃度過(guò)高,測(cè)試時(shí)信號(hào)不好,需稀釋,樣品純度要在90%以上,不要添加任何保護(hù)劑或其它物質(zhì),樣品中應(yīng)避免含有光吸收的雜質(zhì),緩沖劑和溶劑在配制溶液前最好做單獨(dú)的檢查,透明性極好的磷酸鹽可用作緩沖體系。

大連華洋分析儀器有限公司主營(yíng)電化學(xué)工作站,微區(qū)掃描電化學(xué)工作站,多通道電化學(xué)工作站,作為較早將圓二色光譜技術(shù)引進(jìn)國(guó)內(nèi)的公司,華洋科儀始終以科學(xué),嚴(yán)謹(jǐn),專業(yè),領(lǐng)先的形象得到國(guó)內(nèi)外廠商以及客戶的大力支持與信賴

圓二色譜在遠(yuǎn)紫外區(qū)的掃描圖譜,反映的是蛋白質(zhì)肽鍵的排布信息,計(jì)算所得的是蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)比例,即α-螺旋、β-折疊、轉(zhuǎn)角和不規(guī)則卷曲的比例。

圓二色譜在近紫外區(qū)的掃描圖譜,反映的是蛋白質(zhì)側(cè)鏈生色基團(tuán)色氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸等殘基的排布信息和二硫鍵微環(huán)境的變化。
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