華洋科儀圓二色光譜儀是使用最為廣泛的測(cè)定蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)的辦法，是研討稀溶液中蛋白質(zhì)構(gòu)象的一種快速、簡(jiǎn)略、較精確的辦法。它可以在溶液狀況下測(cè)定，較接近其生理狀況。而且測(cè)定辦法快速簡(jiǎn)潔，對(duì)構(gòu)象改變靈敏，所以它是現(xiàn)在研討蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)的首要手法之一，并已廣泛使用于蛋白質(zhì)的構(gòu)象研討中。

用于揣度非對(duì)稱分子的構(gòu)型和構(gòu)象的一種旋光光譜。光學(xué)活性物質(zhì)對(duì)組成平面偏振光的左旋和右旋圓偏振光的吸收系數(shù)(ε)是不相等的，εL≠εR，即具有圓二色性。假如以不同波長(zhǎng)的平面偏振光的波長(zhǎng)λ為橫坐標(biāo)，以吸收系數(shù)之差Δε=εL-εR為縱坐標(biāo)作圖，得到的圖譜即是圓二色光譜，簡(jiǎn)稱CD。

假如某手性化合物在紫外可見(jiàn)區(qū)域有吸收，就可以得到具有特征的圓二色光譜。因?yàn)棣臠≠εR，透射光不再是平面偏振光，而是橢圓偏振光，摩爾橢圓度[θ]與Δε的關(guān)系為：[θ]=3300Δε。圓二色譜也可以摩爾橢圓度為縱坐標(biāo)，以波長(zhǎng)為橫坐標(biāo)作圖。因?yàn)椤鳓庞姓岛拓?fù)值之分，所以圓二色譜也有呈峰的正性圓二色譜和呈谷的負(fù)性圓二色譜。在紫外可見(jiàn)光區(qū)域測(cè)定圓二色譜與旋光譜，其意圖是揣度有機(jī)化合物的構(gòu)型和構(gòu)象。

樣品要求

1. 樣品有必要堅(jiān)持一定的純度不含光吸收的雜質(zhì)，溶劑有必要在測(cè)定波長(zhǎng)沒(méi)有吸收攪擾;樣品能徹底溶解在溶劑中, 構(gòu)成均一通明的溶液。

2. 氮?dú)饬髁康牟倏?

3. 緩沖液、溶劑要求與池子挑選：緩沖液和溶劑在制造溶液前要做獨(dú)自的檢查，看是否在測(cè)定波長(zhǎng)規(guī)模內(nèi)有吸收攪擾，看是否構(gòu)成沉淀和膠狀；在蛋白質(zhì)測(cè)量中，經(jīng)常挑選通明性極好的磷酸鹽作為緩沖體系。

4. 樣品濃度與池子挑選

樣品不同，測(cè)定的圓二色光譜規(guī)模不同，對(duì)池子巨細(xì)(光徑)的挑選和濃度的要求也不一樣。蛋白質(zhì)CD光譜測(cè)量一般在相對(duì)較稀的溶液中進(jìn)行。

原理

圓二色光譜選用特性少高効率的28度入射角干涉儀、集光効率高的光學(xué)系、掃除雙折射元件的反射光學(xué)系，高精度操控光軸，經(jīng)過(guò)操控偽影和經(jīng)時(shí)改變使裝置始終堅(jiān)持佳狀況。圓二色光譜由合適VCD的演算法的DSP確定檢測(cè)功用、完成了信噪比的大幅度改進(jìn)，經(jīng)過(guò)使用只透過(guò)VCD光譜測(cè)量目標(biāo)吸收帶的窄帶濾光片，可以測(cè)得現(xiàn)有辦法測(cè)不到的微小波峰。

根據(jù)圓二色光譜法的原理和測(cè)試要求規(guī)劃制成的儀器稱為圓二色光譜儀?，F(xiàn)在圓二色光譜法及其儀器已廣泛使用于有機(jī)化學(xué)、生物化學(xué)、配位化學(xué)和藥物化學(xué)等領(lǐng)域,成為研討有機(jī)化合物的立體構(gòu)型的一個(gè)重要辦法。   

使用圓二色光譜相關(guān)儀器時(shí)需要留意以下幾點(diǎn)要求

1. 儀器發(fā)生毛病時(shí)應(yīng)及時(shí)報(bào)告技術(shù)人員處理.儀器發(fā)生異?，F(xiàn)象時(shí)，馬上封閉電源，維護(hù)現(xiàn)場(chǎng)并及時(shí)上報(bào)。

2. 不亂按鍵盤(pán)，操作人員不得進(jìn)入操作規(guī)程規(guī)則以外的任何程序，不得按規(guī)則以外的任何功用鍵.卸下火花臺(tái)板時(shí)要輕拿輕放，避免內(nèi)表面劃傷.取出火花室內(nèi)圓石英墊片和玻璃套管時(shí)必須謹(jǐn)慎小心，避免操作不當(dāng)致其破碎。

3. 壓樣品夾子要筆直，不得在未夾好樣品時(shí)按激起鍵，不得在激起時(shí)接觸或抬起樣品夾.假如遇到激起時(shí)聲響很大，應(yīng)該按F3鍵中止，不允許直接抬起樣品夾，否則易造成電路板燒毀。

4. 激起樣品后在火花臺(tái)內(nèi)發(fā)生黑色沉積物可導(dǎo)致電極與火花臺(tái)之間短路，所以火花臺(tái)應(yīng)定期整理。

5. 非崗位人員不得隨意進(jìn)入機(jī)房，機(jī)房?jī)?nèi)禁止吸煙，吃食物。

6. 假如遇到突然斷電時(shí)，應(yīng)先關(guān)總，再將其它電源封閉，等到來(lái)電后，按規(guī)程條款進(jìn)行開(kāi)機(jī)操作。

圓二色光譜的特色

1. 雙光源規(guī)劃帶來(lái)無(wú)可比擬的信噪比，技術(shù)可晉級(jí),可使在測(cè)量固體樣品時(shí)消除固體樣品自身的誤差，同時(shí)采集紅外光譜和振蕩圓二色光譜。圓二色光譜數(shù)字信號(hào)處理,而無(wú)需確定或者電子濾波，獨(dú)立的紅外光源接口、PEM的恒溫對(duì)應(yīng)可以獲得沒(méi)有經(jīng)時(shí)改變的基線。

2. 選用特性少高効率的28度入射角干涉儀、集光効率高的光學(xué)系、掃除雙折射元件的反射光學(xué)系，高精度操控光軸，經(jīng)過(guò)操控偽影和經(jīng)時(shí)改變使裝置始終堅(jiān)持zui佳狀況。圓二色光譜由合適VCD的演算法的DSP確定檢測(cè)功用、完成了信噪比的大幅度改進(jìn)，經(jīng)過(guò)使用只透過(guò)VCD光譜測(cè)量目標(biāo)吸收帶的窄帶濾光片，可以測(cè)得現(xiàn)有辦法測(cè)不到的微小波峰。

3. 光學(xué)系、樣品室、檢測(cè)器都可以進(jìn)行吹掃、可不受大氣的影響安穩(wěn)測(cè)量，一機(jī)多功用，可檢測(cè)紫外吸收光譜,圓二色光譜,總熒光譜,光散色譜, 線二色譜及熒光各相異性譜。圓二色光譜首要用于手性光學(xué)活性物質(zhì)的研討。可用于有機(jī)立體化學(xué)研討、光學(xué)活性物質(zhì)純度測(cè)試、藥物定量分析、天然有機(jī)化學(xué)、生物化學(xué)與宏觀大分子、金屬絡(luò)合物化學(xué)、聚合物化學(xué)、蛋白質(zhì)折疊研討、蛋白質(zhì)構(gòu)象研討、物理化學(xué)等。

4. 橫電磁波，是一種在各個(gè)方向上振蕩的射線。其電場(chǎng)矢量E 與磁場(chǎng)矢量H 相互筆直，且與光波傳達(dá)方向筆直。因?yàn)榘l(fā)生感光作用的首要是電場(chǎng)矢量，一般就將電場(chǎng)矢量作為光波的振蕩矢量。光波電場(chǎng)矢量與傳達(dá)方向所組成的平面稱為光波的振蕩面。若此振蕩面不隨時(shí)刻改變，這束光就稱為平面偏振光，其振蕩面即稱為偏振面。

5. 平面偏振光可分解為振幅、頻率相同，旋轉(zhuǎn)方向相反的兩圓偏振光。其間電矢量以順時(shí)針?lè)较蛐D(zhuǎn)的稱為右旋圓偏振光，其間以逆時(shí)針?lè)较蛐D(zhuǎn)的稱為左旋圓偏振光。兩束振幅、頻率相同，旋轉(zhuǎn)方向相反的偏振光也可以合成為1束平面偏振光。假如兩束偏振光的振幅(強(qiáng)度) 不相同,則合成的將是1束橢圓偏振光。